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人精子在大容量(0.5毫升)无冷冻保护剂中玻璃化:一项新技术

浏览数:601  发表时间:2019-05-24  [ ]

人精子在大容量(0.5毫升)无冷冻保护剂中玻璃化:一项新技术

Cryoprotectant-free vitrification of human spermatozoa in large (up to 0.5 mL) volume: a novel technology.

Isachenko V1, Maettner R, Petrunkina AM, Mallmann P, Rahimi G, Sterzik K, Sanchez R, Risopatron J, Damjanoski I, Isachenko E.

Clin Lab. 2011;57(9-10):643-50. PMID:22029178

摘要

背景:本研究的目的是开发和试验大体积(用于宫内授精)人精子无冷冻保护剂玻璃化的无菌技术。通过这项技术玻璃化的精子不含渗透性冷冻保护剂,复苏后立即可供进一步使用,无需任何额外处理(离心或梯度分离以去除冷冻保护剂)。

方法:将52份经上游法制备的射精液中的每一份分为三份,并分为三个治疗组:第1组: 未经处理对照组;第2组:精子用含甘油的培养液经常规慢速冷冻保存,第3组:精子在0.25 M蔗糖的培养液中用0.5 mL受精“法式”吸管玻璃化。冷冻解冻后,分别于复苏后1、24、48小时测定精子的运动能力、质膜完整性和能力样改变(自发的“冷冻能力”和顶体反应)。

结果:与常规冷冻相比,无菌无冷冻保护剂玻璃化冷冻精子显示出优越的功能特性。玻璃化后细胞质和顶体细胞膜的运动率、完整率明显高于常规冷冻(分别为76%和52%,54%和28%,44%和30%)(P<0.05)。然而,玻璃化冷冻和常规冷冻在甘油存在下,精子表达CTC能力模式的百分比(分别为11%和10%)没有差异(P>0.1)。

结论:利用新型无菌大容量无冷冻保护剂玻璃化技术,可实现对人精子的基本保护。


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